Toplam iç yansıtmalı
fluoresans mikroskopi (TIRFM), bir optik mikroskop kullanarak arayüz yakınında
fluoresans objelerin tayini için geliştirilmiş bir tekniktir.
Toplam iç yansıtmalı
fluoresans mikroskopi tekniği, iki transparan ortam arasındaki arayüzden
elektromagnetik dalgaların yansımasını kullanır. Bu yansıma, ancak ışık, kritik
açıdan (1/n) daha büyük bir açıyla kırılma indeksinin ortamından geçerse
meydana gelir. İkinci ortama giren ışığın şiddeti eksponensiyal olarak azalır;
10 nm'ye kadar bir çözünürlükte ~ 100 nm kalınlığındaki arayüz tabakada ışığın
uyardığı flüoresan objelerin algılamasını sağlar. Bu nedenle, TIRFM floresan
nanoskopi yöntemlerinden biri olarak kabul edilebilir.
Toplam iç yansıtmalı
fluoresans mikroskopi tekniği biyolojik uygulamalarda, hücre membranı ve hücre
membranı yakınındaki yapıların görüntülenmesi için kullanılır.
(a) (cis-) ve (b) (trans-) toplam iç yansıtmalı fluoresans
mikroskop (TIRFM) şematik diyagramları