Toplam İç Yansıtmalı Fluoresans Mikroskopi (total internal reflection fluorescence microscopy)

Toplam iç yansıtmalı fluoresans mikroskopi (TIRFM), bir optik mikroskop kullanarak arayüz yakınında fluoresans objelerin tayini için geliştirilmiş bir tekniktir.

Toplam iç yansıtmalı fluoresans mikroskopi tekniği, iki transparan ortam arasındaki arayüzden elektromagnetik dalgaların yansımasını kullanır. Bu yansıma, ancak ışık, kritik açıdan (1/n) daha büyük bir açıyla kırılma indeksinin ortamından geçerse meydana gelir. İkinci ortama giren ışığın şiddeti eksponensiyal olarak azalır; 10 nm'ye kadar bir çözünürlükte ~ 100 nm kalınlığındaki arayüz tabakada ışığın uyardığı flüoresan objelerin algılamasını sağlar. Bu nedenle, TIRFM floresan nanoskopi yöntemlerinden biri olarak kabul edilebilir.

Toplam iç yansıtmalı fluoresans mikroskopi tekniği biyolojik uygulamalarda, hücre membranı ve hücre membranı yakınındaki yapıların görüntülenmesi için kullanılır.



(a) (cis-) ve (b) (trans-) toplam iç yansıtmalı fluoresans mikroskop (TIRFM) şematik  diyagramları