Konfokal mikroskopi, mikroskala floresan objelerin optik
mikroskopla tespit edilmesini sağlayan bir tekniktir; detektörden önce yerleştirlmiş
bir diyafram odak düzlemindeki objelerin sadece flüoresansının tespit
edilmesine izin verir.
20. yüzyıl sonlarında flüoresan mikroskopi tekniklerinin
hızlı gelişimi, konfokal ve iki foton mikroskobunun ortaya çıkmasına yol açmıştır.
Konvansiyonel flüoresan tekniklerine kıyasla, artan kontrast ve odak derinliği
ile tabaka-tabaka tarama özelliği, tek tek hücrelerin ve doku dilimlerinin ve
küçük organizmaların üç boyutlu görüntülerini kolayca yeniden oluşturmayı sağlar.
Bu nedenle bu teknikler (özellikle konfokal mikroskopi) tıbbi ve biyolojik
uygulamalarda yaygın bir şekilde kullanılmaya başlamıştır. Konfokal mikroskopi,
konvansiyonel mikroskopi tekniklerinden ve iki fotonlu mikroskopiden biraz daha
yüksek bir odak düzlemi çözünürlüğüne sahiptir.
Konfokal Lazer Taramalı Mikroskopide (CLSM), bir floresan
şiddeti kaydedilirken bir lazer odak numune boyunca hareket ettirilir. Pinhollerle
odak-dışı-odak düzlemlerinden flüoresans emisyonu kaldırılmış ve kontrast
arttırılmıştır. Lazer odak konumu ve kaydedilen şiddetin saptanmasıyla,
konfokal bir görüntü oluşturulabilir.
Şekil: (a) Konfokal ve, (b) lazer
taramalı konfokal mikroskopi (Kr/Ar, He/Ne gaz lazerler)
