DNA Prob (DNA probe)

DNA prob, işaretli bir DNA fragmandır; DNA molekülünün spesifik bir fragmanı (parçası) ile hibridizasyon için kullanılır; tamamlayıcı nükleotid dizilerini belirlemeye yardımcı olur.

94-100 0C'lik bir sıcaklıkta, DNA, iplikçikler (strand) arasındaki tamamlayıcı bağlar yok edildiğinden, iki ipliğe ayrılır (denatürasyon). Bu proses geri dönüşümlüdür; 65 ° C'de çift helezonun yapısı, DNA hibridizasyonu (renatürasyon) ile eski haline getirilir. Hibridleşme prosesleri, eğer birbirleri için tamamlayıcıysa, herhangi bir tek strand arasında meydana gelir; DNA-DNA, RNA-RNA, DNA-RNA gibi. Hibridizasyon, DNA mikrodizilerinde kullanılır; burada, örneklerdeki spesifik nükleik asit sekanslar, DNA problar ile hibridizasyon yoluyla tespit edilir. Floresans işaretli problar, numunedeki DNA'nın kantitatif analizinde ‘real-time PCR’ (PCR: polimeraz zincir reaksiyon) için kullanılır. Ayrıca floresans problar, kromozomlardaki spesifik DNA sekanslarını saptamak ve lokalize etmek için kullanılan sitogenetik bir teknik olan, ‘floresans in-situ hibridizasyon (FISH)’da uygulanır.

Nanoteknolojide DNA probları, yeni nesil tespit sistemleri (DNA-nanoçipler) oluşturmada, hastalıklı örneklerde şüpheli bir patojenin varlığını saptamada kullanılabilir. Şekildeki diyagram bir DNA probun, ilgilenilen bir genin şüphelenilen patojenle olan ilişkisini araştırmada nasıl kullandığını gösterilmiştir.


(a)   Vücuttan alınan izolat DNA, (b) denature DNA örneği ve DNA problar,
(c) DNA probların, örnekte
ki gene (varsa) gene bağlanması